国家药品标准物质使用说明书

体外细胞毒性试验阴性对照品

Negative control for in vitro cytotoxicity

【类别】医疗器械标准物质

【批号】350025-202401

【性状】白色固体粒料

【用途】用于医疗产品中细胞毒性体系控制与验证。

【组成】聚乙烯

【细胞存活率】使用本品进行体外细胞毒性试验（MTT 法），细胞存活率范围为：大于 70%

【使用方法和要求】

本品使用常规培养基（10%胎牛血清、2% 4mM 谷氨酰胺、88%不含酚红 MEM 培养基, 配制好的完全培养基在 4℃条件下贮存不宜超过两周）进行浸提。浸提方法如下：无菌操作，取 1g 本品放置于容器中，按照 0.2g/mL 浸提比例加入浸提介质完全培养基，竖直放置振荡，120rpm,37℃条件下震荡浸提 24h，取浸提液用于试验。完全培养基置于同样的容器中，120rpm,37℃条件下震荡浸提 24h，用作空白对照。

体外细胞毒性试验采用 MTT 法进行检测：取状态良好的 L929 细胞，消化离心，配制成 1×10⁵/mL 细胞悬液接种于 96 孔培养板，每组应设立多个复孔，每孔接种 100µL 细胞悬液，置 37℃、5%二氧化碳的 CO2培养箱培养 24h。弃去原培养液，每孔加入 100µL 浸提液，于 CO2培养箱继续培养。24h 后，放置于显微镜下观察细胞形态。弃去孔内液体，每孔加入 50µL 1mg/mL 的无菌 MTT 溶液（MTT 注意现用现配），继续培养 2h 后弃去孔内液体，加入 100µL 异丙醇，振荡混匀，在酶标仪 570nm 和 650nm 波长下测定吸光度，计算细胞存活率。细胞存活率计算公式如下：

细胞存活率（%）= （见报告）

其中：A ── 浸提液平均吸光度

A0 ──空白对照平均吸光度

【包装】棕色瓶；纸盒

【规格】1g/瓶；10 瓶/盒

【贮藏】常温

【有效期】国家药品标准物质不设具体有效期，按照规定条件保存的样品，在中检院发布停用通知前有效。

声明：

1.请按本品说明书规定使用，若作他用，用户须自行证明适用性;

2.因用户使用或储存不当所引起的损害或投诉，用户自行承担相关责任;

3.用户收到本品后应立即核对品种、数量、包装等，若出现质量、数量等不符，相关赔偿只限于标准物质本身，不涉及其他任何损失。