国家标准菌种使用说明书

枯草芽胞杆菌

国家标准菌种[CMCC(B) 63501]

Bacillus subtilis (Ehrenberg) Cohn

【生物安全等级】1

【性状】 乳白或白色、冻干粉

【用途】《中华人民共和国药典》无菌检查、微生物限度检查、抗生素微生物检定法；食品检测；培养基检测；膜过滤效果检测；杀菌剂检测

【包装】棕色西林瓶

【使用方法和要求】

1. 培养基：普通营养琼脂（培养基 51）或适宜培养基。

2. 培养条件：30~32℃，需氧。

3.启开方法：

1) 复苏菌种前应准备各适于该菌种生长的固体、液体培养基和培养设备，所有操作均应在合适的生物安全防护条件下进行；

2) 用 75%酒精棉擦拭西林瓶外部，在安全柜内使用尖嘴钳去除塑料盖及铝盖，注意不要同时打开胶塞。缓慢开启胶塞，用 75%酒精棉消毒瓶口部分，使用无菌吸管注入 0.2ml 适宜的液体培养基复溶冻干粉末；

3) 将上述菌悬液全部吸出，分别接种到固体斜面和液体培养基中，于 30~32℃培养箱中培养 18~24 小时；

4) 次日观察菌种的生长情况，如菌种未生长，应继续培养至 72 小时；

5) 复苏后的菌种按规定使用。

【储藏条件】暂不启开的安瓿可置于 2~8℃保藏。