定量PCR仪校准用质粒DNA含量标准物质可作为测量标准，用于定量 PCR 仪的计量校准和相关仪器性能指标的测试，测量方法确认与评价、分析过程质量控制等。

一、样品制备

本标准物质以 GBW（E）090640 基因突变质粒 DNA 含量标准物质为原料，在洁净环境条件下，采用重量法梯度稀释，与相匹配的 PCR 扩增试剂按设定比例配制成完整的 PCR 反应体系，然后分装到 PCR孔板中制备成定量 PCR 仪校准用标准物质。

二、溯源性及定值方法

本标准物质以重量法制备值作为标准值，并采用数字 PCR 方法进行突变基因拷贝数浓度验证。通过使用量值具有溯源性的 GBW（E）090640 EGFR-1（18-; 19-,20-;21-）基因突变标准物质和经检定/校准的质量、容量等计量器具，确保本标准物质的量值通过重量法制备值各输入量对 SI 基本单位千克（kg）、摩尔（mol）和体积的国家法定计量单位升（L）的溯源，以及由 DNA 相对分子质量进行分子质量和分子数量的转换，实现对拷贝数浓度测量单位的溯源。

三、特性量值及不确定度

所赋特性量值的不确定度由原料标准物质、重量法制备、均匀性和稳定性等引入的不确定度分量合成得到。

四、均匀性及稳定性评估

参照 JJF1343 国家计量技术规范（等效 ISO 指南 35），采用数字 PCR 方法对该标准物质进行均匀性检验研究，结果表明均匀性良好，最小取样量 5 μL。采用数字 PCR 方法对该标准物质进行了稳定性研究，本标准物质自定值日期起，有效期暂定为 10 个月，研制单位将继续跟踪监测该标准物质的稳定性，有效期内如发现量值变化，将及时通知用户。

五、包装、贮存及使用

1.包装规格：本标准物质采用 8 连排管、48 孔板，96 孔板、384 孔板，锡箔纸真空包装，每孔 25 μL。

2.保存条件及运输：置于-20 ℃冰箱中保存。采用干冰运输，收到标准物质后应检查标准物质是否处于冰冻状态。检查无误才可用于实验。

3.使用注意事项：本标准物质为一次性使用，不可反复冻融。使用前应先从冰箱内取出，平衡至室温并混匀，3000 转/分离心后使用。