本标准物质作为测量标准，用于中东呼吸综合征冠状病毒核酸检测的实验室质量控制、检测试剂研发、工作标准品的赋值、仪器校准及试剂评价等多方面。
一、 样品制备
本标准物质将中东呼吸综合征冠状病毒 ORF1ab 基因片段（基因组位置：13261~15700，18101~18400，NC_019843.3），E 基因（27301~27838，NC_019843.3）及 N 基因（28566~29880，NC_019843.3）克隆至质粒载体中，通过体外转录获得包含这三个基因的 RNA 转录子，稀释至一定浓度后分装。
二、 溯源性及定值方法
本标准物质采用数字 PCR 方法以 7 家实验室合作定值的方式测定 ORF1ab、E 及 N 基因拷贝数浓度，作为标准值。通过使用满足计量学特性要求、经确认的绝对定量测量方法和经检定/校准的容量计量器具，确保本标准物质的量值溯源至可作为任何一个量制基本单位的实体数基本单位“一”（符号：1）以及体积的国家法定计量单位升（L）。
三、 特性量值及不确定度
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编号
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名称
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基因名称
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标准值（×105copy/μL）
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扩展不确定度（k=2）（×105copy/μL）
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NIM-RM 5218
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中东呼吸综合征冠状病毒（MERS-CoV）RNA标准物质
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ORF1ab
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1.2
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0.3
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E
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1
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0.3
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N
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1
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0.3
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所赋特性量值的不确定度由定值、均匀性、短期和长期稳定性引入的不确定度分量合成得到。
四、 均匀性及稳定性评估
参照 JJF1343 国家计量技术规范（等效 ISO 指南 35），采用数字 PCR 法对该标准物质进行均匀性研究，结果表明均匀性良好，最小取样量为 5 μL。采用数字 PCR 法对该标准物质进行了稳定性研究，自定值日期起，有效期暂定为 6 个月，研制单位将继续跟踪监测该标准物质的稳定性，有效期内如发现量值变化，将及时通知用户。
五、 包装、贮存及使用
1. 包装规格：本标准物质为溶液形式，采用 0.5 mL 冻存管包装，每管 50 μL。
2. 保存及运输条件：置于-70℃以下冰箱中保存，采用干冰运输。
3. 使用前先从冰箱取出，融化后混匀离心使用，避免反复冻融。
4. 在实验操作过程中佩戴口罩及手套，并使用不含 RNA 酶的试剂及耗材，避免 RNA 降解。
5. 使用本标准物质进行 ORF1ab 基因测量时，请仔细核实拟使用的 PCR 引物序列在病毒基因组的坐标。引物序列不能超出“样品制备”部分描述的基因组坐标范围。