本标准物质主要用于新冠病毒疫苗接种后血清中抗受体结合域（RBD）蛋白中和抗体水平测量方法的验证评价以及实验室质量控制。

一、 样品制备

本标准物质通过哺乳细胞体系重组表达并纯化得到抗新型冠状病毒 RBD 中和抗体标准物质候选物原料。采用 SDS-PAGE、HPLC-SEC 对本标准物质原料进行纯度分析，纯度可达 98%以上；采用生物膜干涉法、假病毒中和实验、酶联免疫吸附方法进行活性评价，结果表明生物活性良好。采用 0.01 M 的磷酸盐缓冲溶液（pH7.4）按照比例稀释后进行分装和定值。

二、 溯源性及定值方法

采用基于氨基酸分析的同位素稀释质谱方法对抗新型冠状病毒受体结合域（RBD）中和抗体溶液的质量浓度进行测定，作为标准物质的标准值。同位素稀释质谱法是国际公认的潜在基准测量方法，通过开展方法确认，以 GBW09236 L-缬氨酸、GBW09237 L-亮氨酸纯度、GBW(E)100084 L-脯氨酸和 GBW09235 L-苯丙氨酸纯度国家一级标准物质为量值溯源参考标准，并使用经检定/校准的称量等计量器具，确保本标准物质的量值溯源至 SI 基本单位千克（kg）和摩尔（mol）。

三、 特性量值及不确定度

所赋特性量值的不确定度由定值测量、均匀性和稳定性引入的不确定度分量合成得到。

四、 均匀性及稳定性评估

参照 JJF1343 国家计量技术规范（等效 ISO 指南 35），采用同位素稀释质谱检测方法，按照随机随机抽样原则对样品中的量值进行均匀性评估，结果表明均匀性良好。本标准物质最小取样量为 20μL，只有在遵循最小取样量的前提下，标准物质的特性值及其不确定度才是有效的。采用同位素稀释质谱和 HPLC-SEC 法对样品进行了初步稳定性评估，结果表明样品稳定性良好，参考同类标准物质的稳定性数据，有效期暂定至 2022 年 2 月 4 日。研制单位将继续跟踪监测该标准物质的稳定性，有效期内如发现量值变化，将及时通知用户。

五、 包装、贮存及使用

1. 包装规格：本标准物质采用 0.5 mL 带盖冻存管包装，每管 100 μL。

2. 保存和运输条件：置于-80℃冰箱中保存。采用干冰运输，收到标准物质后应检查标准物质是否处于冰冻状态，检查无误才可用于实验。

3. 使用注意事项：本标准物质在 4℃和室温环境下至少可以稳定 5 天，不可反复冻融，建议开瓶后分装，并在规定条件下保存，每小份一次性使用。使用时可根据实验需求，用 0.01 M 的PBS（pH7.4）缓冲溶液或样本对本标准物质进行梯度稀释。