耳聋 GJB2 基因质粒 DNA 标准物质可作为测量标准，用于 GJB2 基因突变定性、定量测量，方法确认以及实验室质量控制。
一、样品制备
本标准物质是通过合成 GJB2 基因构建在载体上，提取纯化质粒 DNA，稀释至一定浓度分装。
二、溯源性及定值方法
采用绝对定量方法-数字 PCR 方法对 GJB2 野生型、变型基因拷贝数浓度测定，计算野生或突变型基因占野生与突变基因之和的百分比，得到标准物质的标准值。通过使用满足计量学特性要求、经确认的绝对定量测量方法和经检定校准的容量计量器具，确保本标准物质的量值溯源至可作为任 何一个量制基本单位的实体数基本单位“一”（符号：1）以及体积的国家法定计量单位升（L）。
三、特性量值及不确定度
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标准物质名称
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标准物质编号
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基因型
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丰度（%）
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相对扩展不确定度（k=2）（%）
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野生型基因拷贝数浓度（×108 copies/μL）
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突变型基因拷贝数浓度（×108 copies/μL）
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耳聋 GJB2基因质粒DNA 标准物质
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GBW09122
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野生型
（hg38:chr13：
20188951-20189620）
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99.9
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5.6
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1.60*
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-
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GBW09123
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突变型
（176del16、235delC）
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100
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1.6
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-
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1.81*
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GBW09258
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突变型
（176del16、235delC）
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20.6
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8.3
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2.03*
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0.53*
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*信息值
标准值不确定度评定考虑了定值方法、均匀性、稳定性引入的不确定度分量。
四、均匀性和稳定性评估
参照 JJF1343 国家计量技术规范（等效 ISO 指南 35），采用数字 PCR 方法对该标准物质进行均 匀性检验研究，最小取样量 5 μL，结果表明均匀性良好。按照先密后疏的原则采用数字 PCR 方法对该标准物质进行稳定性考察研究，标准值无方向性变化并通过平均值一致性检验，表明稳定性良好。 本标准物质自定值日期起，有效期为 5 年，研制单位将继续跟踪监测该标准物质的稳定性，有效期内如发现量值变化，将及时通知用户。
五、包装、储存及使用
1.包装规格：本标准物质采用 0.5 mL 带内盖彩色冻存管包装，野生型每管 100 μL，突变型每管50 μL。
2.保存及运输条件：置于-70℃冰箱中保存。采用冰袋运输。
3.使用注意事项：使用前应先从冰箱内取出，平衡至室温后混匀使用。
4.本标准物质可用于下级标准物质的量值的传递。