PIK3CA（E542K 基因突变）基因组 DNA 标准物质作为测量标准用于 PIK3CA 基因 E542K 突变的定性和定量测量，还可用于 PIK3CA 基因 E542K 突变测量方法的验证和实验室质量控制等。
一、样品制备
本标准物质是从永生化细胞系中提取、纯化的全基因组核酸，经测序和凝胶电泳鉴定序列和长度后，稀释至一定浓度后进行分装。一个包装单元含有 100 μL 的基因组 DNA。
二、溯源性及定值方法
采用经国际比对验证的数字 PCR 定值方法对 PIK3CA（E542K）基因突变基因组 DNA 标准物质的突变基因拷贝数浓度、野生基因拷贝数浓度和突变丰度进行定值，得到标准物质的标准值。通过使用满足计量学特性要求、经确认的绝对定量测量方法和经检定/校准的容量计量器具，确保本标准物质的量值溯源至可作为任何一个量制基本单位的实体数基本单位“一”（符号：1）以及体积的国家法定计量单位升（L）。
三、特性量值及不确定度
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编号
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名称
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突变位点
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参数
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标准值
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扩展不确定度
U（k=2）
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GBW09348（原NIM-RM5228）
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PIK3CA（E542K）基因突变基因组DNA标准物质
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E542K
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突变基因（×104copies/μL）
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3.2
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0.4
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野生基因（×104copies/μL）
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1.1
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0.2
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突变基因丰度（%）
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74.7
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1.9
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所赋特性量值的不确定度由定值测量、均匀性和稳定性引入的不确定度分量合成得到。
四、均匀性及稳定性评估
参照 JJF1343 国家计量技术规范（等效 ISO 33405），采用数字 PCR 方法对该标准物质进行均匀性研究，结果表明均匀性良好，最小取样量为 5 μL。按照先密后疏的原则采用数字 PCR 方法对该标准物质进行长期稳定性考察研究，标准值无方向性变化并通过平均值一致性检验，表明稳定性良好，并通过运输稳定性研究确定了标准物质的运输条件。本标准物质自定值日期起，有效期为 4 年，研制单位将继续跟踪监测该标准物质的稳定性，有效期内如发现量值变化，将及时通知用户。
五、包装、贮存及使用
1.包装规格：本标准物质采用 0.5 mL 冻存管包装，每管 100 μL。
2.保存和运输条件：置于-70°C 冰箱中保存，采用冰袋运输。
3.使用注意事项：使用前应先从冰箱内取出，平衡至室温后，放在金属浴 60 °C，600 rpm 孵育 2min，混匀离心再打开瓶盖使用。样品完成取样后，应尽快恢复密封状态。冻融次数建议不超过 15次。