热休克蛋白 90α 溶液标准物质用于实验室 HSP90α 检测方法的确认与评价及测量质量控制。

一、 样品制备

本标准物质是通过大肠杆菌体系重组表达并纯化得到的热休克蛋白 90α 标准物质候选物原料。采用 SDS-PAGE、HPLC-SEC 对本标准物质原料进行纯度分析，纯度为 96.71%。采用 0.01M 磷酸盐缓冲溶液（pH7.4）稀释后进行分装和定值。

二、 溯源性及定值方法

采用基于氨基酸分析的同位素稀释质谱法和基于特异性肽段分析的同位素稀释质谱法对热休克蛋白 90α 溶液的质量浓度进行测定，标准值为两种方法定值结果的算数平均值。同位素稀释质谱法是国际公认的潜在基准测量方法，通过开展方法确认，以 GBW09236 L-缬氨酸、GBW09237 L-亮氨酸、GBW09238 L-异亮氨酸、GBW09235 L-苯丙氨酸及 GBW(E)100084 L-脯氨酸国家一级及二级标准物质为量值溯源参考标准，并使用经检定/校准的称量等计量器具，确保本标准物质的量值溯源至SI 基本单位千克（kg）和摩尔（mol）。

三、 特性量值及不确定度

标准值的不确定度综合考虑了纯度、定值、均匀性、稳定性的不确定度分量。

四、 均匀性及稳定性评估

参照 JJF1343 国家计量技术规范（等效 ISO 指南 35），采用基于氨基酸分析的同位素稀释质谱法，按照随机抽样原则对样品中的量值进行均匀性评估，结果表明样品均匀性良好；采用基于氨基酸分析的同位素稀释质谱法检测方法以及高效液相色谱方法，对样品进行稳定性评估，结果表明样品稳定性良好。本标准物质最小取样量为 20 uL。 参考同类标准物质的稳定性数据，本标准物质有效期暂定为6个月，研制单位将继续跟踪监测该标准物质的稳定性，有效期内如发现量值变化，将及时通知用户。

五、 包装、贮存及使用

1. 包装规格：本标准物质采用 0.5 mL 带盖冻存管包装，每管 100 μL。

2. 保存和运输条件：置于-80℃冰箱中保存。采用干冰运输，收到标准物质后应检查标准物质是否处于冰冻状态，检查无误才可用于实验。

3. 使用注意事项：本标准物质在 4℃下至少可以稳定 7 天，不可反复冻融。使用时可根据实验需求，用 0.01 M 的 PBS（pH7.4）缓冲溶液或样本对本标准物质进行梯度稀释。