本溶液标准物质用于数字 PCR 仪 ROX 荧光通道的荧光强度精密度测量与校准。
一、样品制备
本标准物质原料为荧光素纯品，通过称量，用二甲基亚砜（DMSO）溶解和磷酸缓冲液梯度稀释，分装制备而成。
二、溯源性及定值方法
本标准物质以配制值作为溶液中荧光素浓度的标准值。荧光素纯品原料主成分经定量核磁法进行纯度定值，采用量值具有溯源性的有证标准物质作为定量核磁内标。通过采用量值具有计量溯源性保证的荧光素纯品原料，以及经检定/校准的质量、容量等计量器具，使本标准物质的量值溯源至质量和物质的量的 SI 基本单位摩尔（mol），以及体积的国家法定计量单位升（L）。
三、特性量值及不确定度
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编号
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名称
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标准值(nmol/L)
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相对不确定度(k=2)（nmol/L）
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NIM-RM4066
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CY5 荧光素溶液标准物质
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1.11×103
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0.17×103
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NIM-RM4067
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ROX 荧光素溶液标准物质
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1.67×103
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0.26×103
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NIM-RM4068
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6-HEX 荧光素溶液标准物质
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1.24×103
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0.16×103
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所赋特性量值的不确定度由定值测量、均匀性和稳定性引入的不确定度分量合成得到。
四、均匀性及稳定性评估
参照 JJF1343 国家计量技术规范（等效 ISO 指南 35），采用数字 PCR 方法对该标准物质进行均匀性检验，结果表明均匀性良好，本标准物质最小取样量为 4μL。采用相同测量方法进行长期稳定性考察，结果表明本标准物质在-70℃可稳定保存 6 个月。在 4°C 环境下避光保存可稳定 1 周。研制单位将继续跟踪监测该标准物质的稳定性，有效期内如发现量值变化，将及时通知用户。
五、包装、贮存及使用
1.包装规格：本标准物质采用 0.5 mL 冻存管包装，每管 100 μL。
2.保存和运输条件：置于-70 ℃冰箱中避光保存， 6 个月内使用，-20 ℃储存时，1 个月内使用，避光采用冰袋运输。
3.使用注意事项：本标准物质不建议反复冻融，建议购买后，分装成小体积后冻存使用。该标准物质进行梯度稀释时，可使用磷酸缓冲液作为稀释剂。
4.本标准物质属于有毒有害物质，使用时应注意防护，避免吸入或与皮肤接触。