硫酸奎宁溶液荧光相对强度标准物质,用于荧光光谱仪荧光相对强度的校准,确保荧光光谱测量的准确和可比性,满足荧光材料研发和应用中荧光光谱量值溯源的需求。
一、 样品制备
配制 3.5 μg/mL 的硫酸奎宁溶液和 0.05 M 和 H2SO4空白溶液,对比色皿进行配套,分别将配制的硫酸奎宁溶液和空白溶液封装在已配套的比色皿中。
二、 溯源性及定值方法
1)定值方法:
硫酸奎宁溶液荧光相对强度标准物质使用已校准溯源的荧光量子效率绝对法测量系统对标准物质的荧光相对强度进行定值。
2)溯源性:
荧光量子效率绝对法测量系统使用标准汞氩灯和标准辐射源对波长和荧光相对强度进行校准,溯源至国家光谱辐射照度基准,基准号:国基证(2002)第 082 号;滤光片采用光谱光度滤光器检定装置进行校准,[2008]国量标计证字第 140 号。
三、 特性量值及不确定度
|
波长(nm)
|
相对强度(CPS/Counts)
|
扩展不确定度U(k=2)
|
波长(nm)
|
相对强度(CPS/Counts)
|
扩展不确定度U(k=2)
|
|
380
|
0.005
|
0.006
|
530
|
0.304
|
0.009
|
|
385
|
0.02
|
0.006
|
535
|
0.268
|
0.008
|
|
390
|
0.046
|
0.007
|
540
|
0.234
|
0.007
|
|
395
|
0.091
|
0.009
|
545
|
0.208
|
0.007
|
|
400
|
0.154
|
0.01
|
550
|
0.182
|
0.006
|
|
405
|
0.237
|
0.012
|
555
|
0.16
|
0.005
|
|
410
|
0.333
|
0.015
|
560
|
0.139
|
0.004
|
|
415
|
0.443
|
0.018
|
565
|
0.123
|
0.005
|
|
420
|
0.555
|
0.021
|
570
|
0.107
|
0.003
|
|
425
|
0.661
|
0.024
|
575
|
0.094
|
0.004
|
|
430
|
0.756
|
0.026
|
580
|
0.082
|
0.004
|
|
435
|
0.844
|
0.029
|
585
|
0.071
|
0.004
|
|
440
|
0.914
|
0.032
|
590
|
0.062
|
0.003
|
|
445
|
0.965
|
0.032
|
595
|
0.054
|
0.003
|
|
450
|
0.994
|
0.032
|
600
|
0.048
|
0.002
|
|
455
|
0.997
|
0.032
|
605
|
0.041
|
0.003
|
|
460
|
0.985
|
0.03
|
610
|
0.036
|
0.003
|
|
465
|
0.962
|
0.029
|
615
|
0.032
|
0.002
|
|
470
|
0.928
|
0.027
|
620
|
0.028
|
0.002
|
|
475
|
0.879
|
0.026
|
625
|
0.024
|
0.002
|
|
480
|
0.826
|
0.024
|
630
|
0.021
|
0.003
|
|
485
|
0.772
|
0.022
|
635
|
0.019
|
0.002
|
|
490
|
0.717
|
0.021
|
640
|
0.016
|
0.001
|
|
495
|
0.66
|
0.018
|
645
|
0.015
|
0.003
|
|
500
|
0.6
|
0.017
|
650
|
0.013
|
0.002
|
|
505
|
0.544
|
0.015
|
655
|
0.012
|
0.002
|
|
510
|
0.487
|
0.014
|
660
|
0.01
|
0.002
|
|
515
|
0.436
|
0.012
|
665
|
0.009
|
0.002
|
|
520
|
0.388
|
0.011
|
670
|
0.009
|
0.002
|
|
525
|
0.343
|
0.01
|
|
|
|
四、 均匀性及稳定性评估
参照 JJF1343 国家计量技术规范(等效 ISO 指南 35),采用方差分析法(F 检验法),按照随机抽样原则从 50 个样品中任意抽取 11 个进行均匀性评估,评估结果表明,样品均匀性良好;采用趋势分析检验方法(t 检验法)对样品进行一年稳定性评估,评估结果表明,样品稳定性良好。
本标准物质自定值日期起有效期 12 个月,研制单位将继续跟踪监测该标准物质的稳定性,有效期内如发现量值变化,将及时通知用户。
五、 包装、贮存及使用
本标准物质为一对封装有溶液的比色皿,比色皿尺寸为 12.4 mm*12.4 mm*53 mm,外包装为带有内村的木盒。
本标准物质在室温下干燥、避光的条件下保存。建议运输过程中采取隔振措施,防止比色皿破裂,运输过程中温度不低于 0℃,防止溶液结冰。
使用方法:测量荧光发射光谱时,入射面为比色皿上标有 QS 和 Blank 的面。激发波长为 347 nm,激发单元单色仪的狭缝为 10 nm,发射单元单色仪的狭缝为 3 nm,积分时间为 0.3 s,发射光波段光谱采集波长范围为 380 nm-670 nm,步长推荐采用 0.5 nm,对标准物质硫酸奎宁溶液(QS)的发射光谱(SQm)和空白溶液(Blank)的发射光谱(SBm)重复测量 3 次,硫酸奎宁溶液光谱减去空白溶液光谱后进行归一化,并取平均值作为荧光相对强度测量曲线(Sm),采用标准曲线(Sst)除以测量曲线得到校准曲线:Cint=Sst/Sm。
六、 参考文献
[1] ZAVADIL J, HONC T, TYROKY J. Influence of optical fibers on the spectrum of transmitted light-emitting-diode radiation. Appl Opt, 1995, 34 (21): 4312-4315.
[2] MISHIMA S, OSHIMA K. The Study of Spectral Correction for Self-Absorption of Radiation Unit in Integrating Photometer. Ieej Transactions on Electronics Information & Systems, 2008, 128 (11):1605-1609.
[3] WURTH C, GRABOLLE M, PAULI J et al. Relative and absolute determination of fluorescence quantum yields of transparent samples. Nature Protocols, 2013, 8 (8): 1535-1550.
[4] JJG 1006-1994《一级标准物质技术规范》。