EGFR（L858R）基因突变循环肿瘤DNA标准物质作为测量标准用于EGFR（L858R）基因突变的定性和定量测量，还可用于EGFR（L858R）突变测量方法的验证和实验室质量控制等。
一、样品制备（此系列有四个号：NIM-RM4043、NIM-RM4044、NIM-RM4045、NIM-RM4046）
本标准物质是通过PCR扩增获得长度为154bp的含有目标突变的基因片段，然后与片段化的野生型基因组核酸按照一定的比例配制、分装。一个包装单元含有100μL×2瓶。
二、溯源性及定值方法
由8家实验室采用数字PCR方法对EGFR（L858R）基因突变标准物质的突变基因拷贝数浓度、野生基因拷贝数浓度和突变基因丰度进行测定，平均值作为标准物质的标准值。本标准物质通过使用满足计量学特性要求的制备方法、测量方法和计量器具，保证其量值溯源性。
三、特性量值及不确定度
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编 号
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名 称
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特性量及单位
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标准值
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扩展不确定度(k=2)
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NIM-RM4044-1
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EGFR(L858R)基因突变循环肿瘤 DNA 标准物质
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突变基因拷贝数浓度（copy/μL）
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7
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1
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野生基因拷贝数浓度（copy/μL）
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487
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48
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突变基因丰度（%）
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1.5
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0.3
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NIM-RM4044-2
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EGFR（L858R）基因突变循环肿瘤 DNA 标准物质
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突变基因拷贝数浓度（copy/μL）
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26
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3
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野生基因拷贝数浓度（copy/μL）
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473
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49
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突变基因丰度（%）
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5.2
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0.5
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标准值不确定度由定值方法、均匀性和稳定性等分量组成。
四、均匀性检验及稳定性考察
按照JJF1343-2012《标准物质定值的通用原则及统计学原理》要求，采用数字PCR方法对该标准物质进行均匀性检验研究，最小取样量7μL，结果表明均匀性良好。按照先密后疏的原则采用数字PCR方法对该标准物质进行稳定性考察研究，标准值无方向性变化并通过平均值一致性检验，表明稳定性良好。本标准物质自定值日期起，有效期为3年，研制单位将继续跟踪监测该标准物质的稳定性，有效期内如发现量值变化，将及时通知用户。
五、包装、贮存及使用
1.包装与储存：本标准物质采用0.5mL立式拧口塑料离心管包装，100μL/瓶。建议-70˚C低温长期保存。
2.使用注意事项：使用前应先从冰箱内取出，平衡至室温后离心再打开瓶盖使用。样品开封后，应尽快恢复密封状态。