本标准物质可作为测量标准用于流感病毒（甲型 H5N1）核酸定性、定量检测，适用于检测方法验证、产品开发与评价，及实验室质量控制等领域。
一、 样品制备
本标准物质是将甲型流感病毒 H5N1 亚型 HA 基因（GenBank: OP597636.1, 1-1735)和 M 基因（Gisaid: EP_ISL_9012696, 1-932）进行人工合成并克隆至质粒载体中，通过体外转录的方式获得了两条 RNA 转录子，对 RNA 转录子进行纯化后稀释至一定浓度进行混合、分装制得 RNA 标准物质。
二、 溯源性及定值方法
本标准物质采用经国际比对验证的逆转录数字 PCR 方法测定甲型流感病毒 H5N1 亚型 HA 及 M基因的 RNA 拷贝数浓度，并通过 IDMS 方法进行逆转录效率修正后作为标准值。通过使用满足计量学特性要求、经确认的绝对定量测量方法和经检定/校准的容量计量器具，确保本标准物质的量值溯源至可作为任何一个量制基本单位的实体数基本单位“一”（符号：1）以及体积的国家法定计量单位升（L）。
三、 特性量值及不确定度
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编号
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名称
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基因名称
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标准值（×104，copies/μL）
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U (k=2)（×104，copies/μL）
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NIM-RM5255
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流感病毒（甲型H5N1）HA/M基因体外转录RNA标准物质
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HA
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3.1
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0.4
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M
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3.6
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0.4
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所赋特性量值的不确定度由定值、均匀性、稳定性引入的不确定度分量合成得到。
四、 均匀性及稳定性评估
参照 JJF1343 国家计量技术规范（等效 ISO 指南 35），采用数字 PCR 法对该标准物质进行均匀性研究，结果表明均匀性良好，最小取样量为 5 μL。采用数字 PCR 法对该标准物质进行了稳定性研究，自定值日期起，有效期暂定为 6 个月，研制单位将继续跟踪监测该标准物质的稳定性，有效期内如发现量值变化，将及时通知用户。
五、 包装、贮存及使用
1. 包装规格：本标准物质为溶液形式，采用 0.5 mL 冻存管包装，每管 50 μL。
2. 运输和储存条件：采用干冰运输，置于-70℃以下冰箱中长期保存。
3. 使用前先从冰箱取出，平衡至室温并混匀后使用。使用时采用无 RNA 酶试剂耗材，防止 RNA降解。不可反复冻融，建议开瓶后，按实际使用需求，用无 RNA 酶耗材进行分装。