口罩细菌过滤效率（bacterial filtration efficiency，BFE）是口罩防止疾病传播能力的关键参数，也是口罩质量评价的重要性能指标。BFE 检测需要特定的 BFE 检测仪，联合定量的金黄色葡萄球菌方可进行。目前，我国已通过《口罩细菌过滤效率检测仪校准规范》，来保证 BFE 检测结果的可靠、可比与国际互认。规范规定，校准应采用金黄色葡萄球菌有证标准物质，其标准菌株的来源和菌株号应为 ATCC6538 或 CHPC1.8395 或 NPRC(S)01.8395；量值范围为（3.0~7.0）×105 mL-1，扩展不确定度不高于 20%。因此，研制满足规范要求的标准物质十分必要。本标准物质可有效用于 BFE 检测及相关仪器校准，填补了国内外空白。

一、 样品制备

选取标准菌株金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）（NPRC(S) 01.8395），作为标准物质原材料。培养后与保护剂混匀，用移液器分装至西林瓶进行冻干，随后压盖密封。

二、 溯源性及定值方法

采用流式计数法（见附件 A）和平板计数法（见附件 B）对金黄色葡萄球菌进行测定，得到标准物质的标准值，其量值单位为 mL^-1。通过使用满足计量学特性要求、经确认的行业公认测量方法和经检定/校准的容量计量器具，确保本标准物质的量值溯源至单位“一”（符号：1）及国家法定计量单位升（L）。

注：流式计数法测量该标准物质的量值单位可表示为 cells/mL；平板计数法测量该标准物质的量值单位可表示为CFU/mL（CFU，菌落形成单位 Colony-Forming Units）。

三、 特性量值及不确定度

所赋特性量值的不确定度由定值测量、均匀性和稳定性引入的不确定度分量合成得到。

四、 均匀性及稳定性评估

参照 JJF1343 国家计量技术规范（等效 ISO 指南 33405），采用流式计数法进行均匀性评估，结果表明均匀性良好，最小取样量为 1000 μL。采用流式计数法进行稳定性评估，按照先密后疏的原则进行了 9 个月的稳定性评估，标准值无方向性变化。该标准物质自定值之日起，有效期为 9 个月，研制单位将继续跟踪监测该标准物质的稳定性，有效期内如发现量值变化，将及时通知用户。

五、 包装、贮存及使用

1.包装与保存：本标准物质呈冻干粉状，采用棕色西林瓶包装；-20℃保存，采用干冰运输。

2.使用：本标准物质开瓶后应当一次性完全使用。使用前在（20℃±5℃）平衡 5 min，开瓶后用100 mL 稀释液复溶。用户可使用流式分析仪等仪器，参考附件 A《口罩细菌过滤效率检测用金黄色葡萄球菌计数标准物质测量方法-流式计数法》进行测试；或使用 Baird-Parker 培养基，参考附件 B《口罩细菌过滤效率检测用金黄色葡萄球菌计数标准物质测量方法-平板计数法》进行测试。用户还可参考附件 C《口罩细菌过滤效率检测仪校准方法》，使用本标准物质对口罩细菌过滤效率检测仪的阳性质控重复性、通道平行性和平均颗粒直径重复性进行校准。

3. 本标准物质含有微生物，使用时应采取符合生物安全二级及以上要求的防护措施。使用前应佩戴口罩和乳胶手套；使用时应注意防护，避免吸入或与皮肤接触；使用后的剩余样品、包装瓶及取样吸头等消耗品应高压灭菌后按生物污染废弃物进行处置。

六、合作者

中国疾病预防控制中心、中国疾病预防控制中心传染病预防控制所、北京市食品检验研究院、北京大学、河北省食品检验研究院。

七、参考文献

[1] JJF XXXX（待定） 口罩细菌过滤效率检测仪校准规范[S].

[2] YY 0469 医用外科口罩[S].

[3] ISO 19344 Milk and milk products — Starter cultures, probiotics and fermented products —Quantification of lactic acid bacteria by flow cytometry[S].

[4] GB 4789.10 食品安全国家标准 食品微生物学检验 金黄色葡萄球菌检验[S]