基孔肯雅病毒包膜蛋白 E1 溶液标准物质作为测量标准，用于基孔肯雅病毒包膜蛋白 E1 抗原免疫法检测的量值溯源、测量方法验证评价以及实验室质量控制。

一、 样品制备

本标准物质是以公布的 NCBI GenBank 中基孔肯雅热病毒（CHIKV）E1 基因（9994-11314 位）的序列为依据，构建包含 E1 蛋白全长的质粒，经大肠杆菌重组表达得到重组的 CHIKV E1 蛋白，经进一步纯化后得到 E1 蛋白标准物质原料，采用超纯水按照比例稀释后进行分装和定值。

二、 溯源性及定值方法

基于氨基酸分析的同位素稀释质谱方法对基孔肯雅病毒包膜蛋白 E1 溶液的质量浓度进行测定，作为标准物质的标准值。同位素稀释质谱法是国际公认的潜在基准测量方法，通过开展方法确认，以 GBW09237 L-亮氨酸纯度和 GBW09235 L-苯丙氨酸纯度国家一级标准物质为量值溯源参考标准，并使用经检定/校准的称量等计量器具，确保本标准物质的量值溯源至 SI 基本单位千克（kg）和摩尔（mol）。

三、 特性量值及不确定度

标准值的不确定度综合考虑了定值过程、均匀性、稳定性的不确定度分量。

四、 均匀性及稳定性评估

参照 JJF1343 国家计量技术规范（等效 ISO 33405），采用同位素稀释质谱方法对该标准物质进行均匀性研究，结果通过 F 检验，表明均匀性良好，最小取样量为 20 μL。采用同位素稀释质谱和高效液相方法对该标准物质进行了初步稳定性研究，参考同类标准物质的稳定性数据，有效期暂定为6个月，研制单位将继续跟踪监测该标准物质的稳定性，有效期内如发现量值变化，

将及时通知用户。

五、 包装、贮存及使用

1.包装规格：本标准物质采用 0.5 mL 带盖冻存管包装，每管 100 μL。

2.保存和运输条件：置于-70℃冰箱中保存。采用干冰运输，收到标准物质后应检查标准物质是否处于冰冻状态。检查无误才可用于实验。

3.使用注意事项：本标准物质在 4°C、室温和 60°C 环境下不稳定，在室温下可稳定 1 小时，可冻融 3 次使用。使用时标准物质复溶后应在冰水浴中进行稀释操作，稀释完成后立即上机测定,常温下的操作时间不要超过 1 h。对本标准物质进行梯度稀释时，推荐使用 PBS 缓冲溶液作为稀释剂。